物理和化學特性

結構式：

分子量：533.88

外觀：淡黃色粉末

可溶于：水或DMSO

光譜特性：激發=352nm，發射=461nm

生物應用

Hoechst染料是一系列熒光染料，用于在熒光顯微鏡中標記DNA。 因為這些熒光染色標記DNA，它們也常用于可視化細胞核和線粒體。 通常使用這些密切相關的雙苯并酰亞胺中的兩種，Hoechst 33258和Hoechst 33342。 兩種染料都被約350nm的紫外光激發，并且都發射藍/青色熒光，發射值為461nm。 Hoechst染色劑可與活細胞或固定細胞一起使用，并且通常用作另一種核酸染色劑DAPI的替代物。 它們之間的關鍵區別在于Hoechst 33342的額外乙基使其更具親脂性，因此更容易穿過完整的細胞膜。 在某些應用中，Hoechst 33258的滲透性明顯低于Hoeschst 33342.這些染料也可用于通過繪制標準的發射 - 含量曲線來檢測樣品DNA的含量。

染色細胞方案

以下方案適用于大多數細胞類型。生長培養基，細胞密度，其他細胞類型的存在和其他因素可能影響染色。玻璃器皿上的殘留洗滌劑也可能影響許多生物的真實或明顯染色，導致在有或沒有細胞存在的溶液中出現明亮染色的物質。

通過離心沉淀細胞并將細胞重懸于緩沖鹽溶液或培養基中，在pH7.4下具有**染料結合。培養物中的貼壁細胞可以在蓋玻片上或細胞培養孔中原位染色。使用0.5和5mM之間的濃度添加Hoechst染色，并將其培養15至60分鐘。在起初的實驗中，在整個建議的范圍內嘗試幾種染料濃度，以確定產生染色的濃度。

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