鈣離子熒光探針Fluo4組織切片
A. 鈣離子熒光探針Fluo4對于任何常見切片,處理至常規可以進行**染色時,或完成常規的**染色后,即可進行后續的Hoechst染色。
B. PBS或0.9%NaCl洗兩遍,每次3分鐘,吸盡液體。洗滌時宜用搖床,或手動晃動數次。可在六孔板中操作。
C. 加入0.5ml Hoechst 33258染色液,染色5分鐘。也宜用搖床,或手動晃動。
D. 用PBS或0.9%NaCl洗兩遍,每次3分鐘。
E. 將切片置于載玻片上,滴一滴抗淬滅封片液,蓋上一潔凈的蓋玻片,盡量避免氣泡。
F. 熒光顯微鏡可檢測到呈藍色的細胞核。激發波長在350nm左右,發射波長在460nm左右,
鈣離子熒光探針Fluo4的吸收光譜和發射光譜,左側峰為吸收光譜,右側峰為發射光譜。
DAPI染核
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