谷胱甘肽(GSH)，一種非典型的三肽化合物，幾乎存在于身體的每一個細胞中，它對人體的重要性就不言而喻了?？焖贆z測谷胱甘肽的試劑，百螢生物（Biolite）為您推薦AAT Bioquest經過多年研發，被各大科研機構成熟運用的GSH/GSSG比率檢測試劑盒。
谷胱甘肽，是由三個氨基酸（半胱氨酸、谷氨酸、甘氨酸）組成的短肽，含有γ-酰胺鍵和巰基。它具有抗氧化作用和**作用，能夠幫助人體保持正常的**系統功能。它分為兩種形態：還原型（G-SH）；氧化型（G-S-S-G）。
（左：還原型谷胱甘肽，右：氧化型谷胱甘肽。圖片來源于網絡）
在健康細胞中，超過90％的谷胱甘肽總量為還原型（GSH）。當細胞暴露于增加的氧化應激水平時，GSSG積累并且GSSG與GSH的比例增加。 GSSG-GSH比例增加是氧化應激的指標。監測生物樣品中還原和氧化的GSH對于評估細胞/組織對氧化和自由基介導的細胞損傷的氧化還原和**狀態是必不可少的。
百螢生物（Biolite）出售的Amplite?熒光法谷胱甘肽GSH/GSSG比率檢測試劑盒是一種超靈敏、可定量分析細胞樣品中GSH含量的試劑盒。該試劑盒使用專有的非熒光染料，與GSH反應后變為強熒光。使用一步熒光法，可在100μL測定體積（10 nM）中檢測少至1皮摩爾的GSH或GSSG。它可以在96孔或384孔微量滴定板下進行實驗，并且容易適應自動化而無需分離步驟。信號可通過熒光酶標儀在Ex / Em = 490 / 520nm處輕松讀取。
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Components
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Amount
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Component A: Thiolite? Green
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1 vial
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Component B: Assay Buffer
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1 bottle (25 mL)
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Component C: GSH Standard
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1 vial (62 mg)
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Component D: DMSO
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1 vial (200 mL)
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Component E: GSSG Probe
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1 bottle (lyophilized powder)
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Component F: GSSG Standard
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1 vial (124 mg)
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（表格為試劑盒各組分）
該試劑盒96孔檢測樣品數據分析
圖1.使用Gemini熒光酶標儀（Molecular Devices），在具有Amplite TM熒光谷胱甘肽GSH / GSSG比率測定試劑盒的黑色96孔板中測量降低的GSH劑量反應。 向每個孔中加入50μLGSH標準品（0.01至5μM）或空白對照，然后加入50μLGSHAssay Mixture。 孵育30分鐘后，在Ex / Em = 490 / 520nm處測量熒光強度。
圖2. 使用Gemini熒光酶標儀（Molecular Devices），在黑色96孔板中用Amplite TM熒光谷胱甘肽GSH / GSSG比率測定試劑盒測量總GSH劑量反應。 將50μLGSSG標準品（0.01至5μM），含GSH的樣品或空白對照加入每個孔中，然后加入50μL總GSH反應混合物。 孵育30分鐘后，在Ex / Em = 490 / 520nm下測量熒光強度。
Panel A (GSH) Panel B (GSSG)
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458.35
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141
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634.993
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336
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257.558
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….
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….
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428.513
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428.513
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….
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….
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160.928
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281.123
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93.101
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151.857
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54.436
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96.522
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33.434
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53.277
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24.155
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34.407
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13.239
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12.505
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GSH校準曲線如圖1所示：Log（y）= 2.1362 + 0.89694Log（x）（1）
總GSH校準曲線如圖2所示：Log（y）= 2.1231 + 0.8166Log（x）（2）
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品牌
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貨號
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檢測
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儀器
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AAT
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僅標記巰基
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酶標儀
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AAT
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10060
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總巰基、GSH/GSSG
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AAT
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22810
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細胞內GSH
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流式細胞儀、熒光顯微鏡
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