百螢教您選擇正確的ROS探針，正確的選擇讓實驗不再迷茫。活性氧（ROS）是化學反應性的含氧化學物質，其作為細胞代謝的副產物而產生。 在動物細胞中，ROS的產生通常發生在線粒體中。 在植物細胞中，ROS也可以在葉綠體中產生。 *近，已顯示ROS在過氧化物酶體和各種細胞類型的質膜氧化酶中產生。
當過量產生時，ROS一直被認為會導致細胞大分子如DNA，脂質和蛋白質的損傷。 從整體上講，這是由細胞的氧化應激狀態表示的。 這種應激狀態與細胞過程如細胞凋亡有關，而且在宏觀上更像是在許多人類**的發病機制中發揮作用。
由于其具有破壞性的影響，細胞有幾個精心調節的系統來管理過量的ROS。 *充分研究的系統是谷胱甘肽 - 抗壞血酸循環，其使用NADH和NADPH作為電子供體將H2O2**為H2O。 其他系統包括酶，例如超氧化物歧化酶，其催化超氧陰離子（O 2- ）歧化成O 2或H 2 O 2，和過氧化氫酶，其催化H 2 O 2分解成H 2 O和O 2。
ROS對細胞的利與弊導致它們早已被廣泛的研究了，但是*近研究已經研究了ROS在細胞信號傳導中的作用。 在控制量方面，ROS已被證明可調節基因活化。 然而，出現這種情況的具體機制仍有爭議。ROS可能與特殊受體結合，這些受體啟動信號級聯，導致基因調控。 ROS也可能通過調節蛋白質磷酸化直接修飾這種信號級聯中的蛋白質。
既然ROS對細胞作用如此之大且類型繁多，那么如何才能正確的選擇探針對ROS進行檢測呢？
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檢測目標
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作用目標
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探針
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貨號
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原理
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過氧化氫（H2O2）
許多酶促ROS**途徑的產物。 *充分研究的是超氧化物歧化酶活性，其催化超氧陰離子還原為過氧化氫。
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活細胞
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DCFH-DA
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15204
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探針進入細胞，其中酯酶裂解雙乙酸酯基團。 然后DCFH被過氧化氫氧化成DCF并在激發時發出綠色熒光。
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二氫羅丹明123
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15206/15207
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探針被動地滲透細胞膜。 通過過氧化氫氧化產生羅丹明123，其在激發時發出藍色熒光。
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OxiVision? Blue
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11504/11505
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探針滲透細胞并被細胞內過氧化氫氧化，激發時產生熒光
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OxiVision? Green
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11503/11506
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細胞提取物
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Amplite?熒光過氧化氫檢測試劑盒（紅色）
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11501
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過氧化氫依賴氧化ADHP（同義詞：10-乙?；?3,7-二羥基吩惡嗪，Amplex®Red）通過辣根過氧化物酶（HRP）將ADHP轉化為試鹵靈。 可以使用比色法或熒光法檢測試鹵靈。
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Amplite?比色過氧化氫檢測試劑盒
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11500
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Amplex?紅色過氧化氫/過氧化物酶檢測試劑盒
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/
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辣根過氧化物酶（HRP）對過氧化氫IR的過氧化氫依賴性氧化產生活化的探針。 激發會發出近紅外熒光信號
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Amplite?熒光過氧化氫檢測試劑盒（紅外光）
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11502
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檢測目標
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作用目標
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探針
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貨號
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原理
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超氧陰離子（O2-）
有氧代謝的副產物，如線粒體呼吸（特別是復合物I和復合物III）
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活細胞/細胞提取物
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lucigenin（光澤精）
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21259
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通過轉化為光澤精陽離子基團激活光澤精。 光澤精陽離子自由基與超氧陰離子反應生成二氧雜環丁烷中間體，其分解為N-甲基吖啶酮。 N-甲基吖啶酮中的高能電子降低能量狀態，導致發光。
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Coelenterazine（腔腸素）
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21150
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超氧陰離子的氧化導致激發的電子態。 在衰變到基態電子配置時，光子作為發光釋放。
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Luminol（魯米諾）
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11050
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超氧化物依賴性酶催化魯米諾的氧化導致發光。
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Hydroethidine（二氫乙錠）
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15200
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探針被動地滲透完整細胞并定位于線粒體中。 通過超氧化物氧化激活探針。 活化的探針與DNA嵌入，并在激發后發熒光。 DNA結合是強熒光信號所必需的。 對于氫化乙啶，活化的探針是乙錠（即與DNA染色溴化乙錠相同的活性物質）
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MitoSox? Red
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/
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MitoROS? 580
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16052/22970/22971
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MitoROS? 520
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16060
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探針容易通過完整的細胞膜，然后定位在線粒體中。 然后通過超氧化物氧化。 激發后，它會釋放出綠色熒光
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檢測目標
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作用目標
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探針
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貨號
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原理
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羥基（?OH）
當超氧陰離子與過渡金屬反應時可以產生。 極度反應。 可以與DNA骨架上的氫反應，導致鏈斷裂。
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活細胞/細胞提取物
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MitoROS? OH580
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16055
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探針能夠自由地進入活細胞，其中活細胞被游離羥基特異性氧化。 激發后，氧化的探針發出紅色熒光。
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總ROS
包括過氧化氫，超氧陰離子，羥基自由基，單線態氧，一氧化氮，過氧化丁基和次氯酸
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活細胞/細胞提取物
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ROS? Brite 570
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16000/22902
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探針被動地滲透完整的細胞膜。 一旦進入細胞內，探針就被細胞內的ROS氧化。 探針也可以在溶液中被ROS氧化，用于細胞提取物測定。 激發后，探針發出熒光信號。
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ROS? Brite 670
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16002/22901
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ROS? Brite 700
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16004/22903
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Amplite? ROS Green
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22900
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