在擴增反應的線性部分期間進行PCR產物的測量,從而允許模板的準確定量。幾種用于PCR產物的實時定量的方法,包括使用熒光標記的引物或分子信標的熒光共振能量轉移技術。還可以使用Cyber Green 監測反應期間PCR產物的鑒定。此外,通過在線毛細管PCR結合激光誘導熒光檢測,向反應混合物中添加Cyber Green 染色,檢測出單個DNA分子.Cyber Green 優先結合dsDNA,可以準確定量雙鏈產物。單鏈寡核苷酸引物的存在。 Cyber Green 在PCR反應所需的極端溫度下具有高穩定性,不會干擾Taq聚合酶。通過在測定后使用Cyber Green 測量產物的熔融溫度,可以實現定量所需產物的改進的特異性。沒有堿基錯配的雙鏈DNA將顯示比含有錯配的非特異性模板更高的解鏈溫度。實時定量PCR實驗可以通過使用專用于該應用的儀器或通過在不同時間點手動量化擴增產物來進行。
使用Cyber Green 的實時定量PCR用于基因突變的可靠且簡單的測定,包括蚊子抗藥性基因的重復和缺失,人類**基因中的染色體易位和堿基替換。它還被用于鑒定病毒,**或**病原體。此外,該方法已成功用于定量逆轉錄PCR。
圖1.使用Cyber Green (Cat#17591)對KIR基因(殺傷細胞**球蛋白樣受體)的10倍系列稀釋液(3×10 5至3個copies)進行實時定量PCR的擴增曲線。
相關產品訂購信息
貨號
|
產品名稱
|
規格
|
價格
|
17004
|
氨基烯丙基-DUTP鈉鹽 4mM AA-dUTP
|
1 umole
|
1140
|
17021
|
氨烯丙基UTP鈉溶液 4mM AA-UTP
|
250 uL
|
3540
|
17016
|
1mM Biotin-11-dUTP溶液
|
25 nmoles
|
1140
|
17017
|
1mM Biotin-16-dUTP溶液
|
25 nmoles
|
1140
|
17018
|
1mM Biotin-20-dUTP溶液
|
25 nmoles
|
1140
|
17591
|
Cyber Green 20X水溶液PCR定量
|
5x1 ml
|
2340
|
17590
|
Cyber Green 核酸凝膠染料 10000X DMSO
|
1ml
|
5940
|
17024
|
1mM DEAC-dUTP溶液
|
25 nmoles
|
1140
|
17022
|
1mM Fluorescein-dUTP溶液
|
25 nmoles
|
1140
|
17011
|
1mM mFluor dUTP溶液
|
25 nmoles
|
3540
|
395
|
6-ROX甘氨酸 25 uM熒光法PCR檢測參照液
|
5ml
|
2340
|
17023
|
1mM Tetramethylrhodamine-dUTP溶液
|
25 nmoles
|
1140
|
17006
|
1mM TF1-dUTP溶液
|
25 nmoles
|
3540
|
17007
|
1mM TF2-dUTP溶液
|
25 nmoles
|
3540
|
17008
|
1mM TF3-dUTP溶液
|
25 nmoles
|
3540
|
17009
|
1mM TF4-dUTP溶液
|
25 nmoles
|
3540
|
17010
|
1mM TF5-dUTP溶液
|
25 nmoles
|
3540
|
百螢生物是 AAT Bioquest 中國區域**代理商,為國內提供 AAT 的原裝產品及產品定制、技術服務,歡迎咨詢、訂購!