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- 產品名稱：Amplite?小鼠載脂蛋白A1（ApoA1）試劑盒
- 產品型號：V101070
- 產品展商：AAT Bioquest
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簡單介紹
小鼠載脂蛋白A1（ApoA1）試劑盒*針對ELISAPro自動ELISA處理進行了優化*
產品描述
Amplite?小鼠載脂蛋白A1（ApoA1）試劑盒*針對ELISAPro自動ELISA處理進行了優化*
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貨號
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V101070
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存儲條件
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Multiple
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規格
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96 Tests
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價格
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Ex (nm)
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Em (nm)
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分子量
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溶劑
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產品詳細介紹
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產品訂購：QQ:1485814040
聯系電話：18691576690
02968064558
簡要概述
Mabtech的經過仔細驗證的ELISAPRO試劑盒提供了所有必需的試劑，以方便，可靠，特異的方式方便地定量測定血清，血漿和細胞培養上清液中的分析物。
ELISA測定原理
ELISAPRO試劑盒隨附有預先涂有單克隆抗體（mAb）。樣品中的分析物被包被的mAb捕獲，并被生物素化的檢測mAb和鏈霉親和素-HRP（SA-HRP）檢測。注：TMB底物的添加將導致底物出現顏色。用硫酸終止反應，并且可以使用ELISA板酶標儀定量光密度。通過與平行分析的ELISA標準品的系列稀釋液比較來確定分析物的濃度。
所需材料
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酶標儀可在450 nm讀取
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ELISA平板清洗器；自動或手動（例如，多移液管或噴射瓶）、精密移液管，吸頭和量筒
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用于標準和樣品稀釋的試管
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蒸餾水或去離子水
**信息
Stop溶液0.18 M H2SO4（<1％）對眼睛和皮膚有刺激性，應小心處理。由于不知道暴露的影響，因此應仔細處理該標準。溶液中的緩沖液和試劑含有防腐劑Kathon CG（0.002％），這是一種潛在的過敏原，可能通過皮膚接觸引起過敏。人和動物樣品應被視為潛在危險的生物材料。所有材料應按照當地法規進行處理。有關更多信息，請查閱我們網站上的《**數據表》。
制備
在開始測定之前，讓板和測定試劑達到室溫（TMB底物除外，*好使用冷底物）。
計劃板布局，使其一式兩份，包括標準曲線，樣品和測定背景對照。每孔的體積不應超過100μl。
產品說明書
樣品實驗方案
儲備溶液配制
1.洗滌緩沖液
將50 ml洗滌緩沖液濃縮液添加到950 ml蒸餾水或去離子水中（足以完成1個板的所有洗滌步驟）。如果在20倍濃縮物中形成了晶體，則將其升至室溫并輕輕混合以溶解。
2.樣品稀釋液
通過用蒸餾水或去離子水將樣品稀釋液濃縮液稀釋5倍來準備所需體積的樣品稀釋液。對于每個板，將30 ml樣品稀釋液添加到120 ml水中。
3.樣品
所有樣品均應在樣品稀釋液中稀釋至少2倍。除去可見的沉淀物并在聚丙烯管/板中稀釋，應在樣品之前添加緩沖液。高度溶血和高血脂的樣品可能會導致定量結果不準確。含有超出分析標準范圍的高水平分析物的樣品將需要進一步稀釋。
4.小鼠血清/血漿稀釋指南
根據對BALB / c和C57BL / 6樣品的重復分析，我們建議稀釋倍數為200,000X。**的移液非常重要，在稀釋步驟之間更換吸頭，并使用新鮮制成的稀釋液。試劑的含量足以重復使用。
5. ELISA標準
通過添加1 ml標準重構緩沖液將ELISA標準液重構為1μg/ ml的原液。不要攪拌。讓標準液溶解20分鐘并徹底混合。標準液應等份保存在-20°C下。避免重復凍融循環。
6.編制標準曲線
如圖所示，稀釋標準儲備溶液以創建標準曲線。指示的數量足以重復。*后一個樣品瓶用作測定背景對照，即應省略標準液。在使用30分鐘內準備標準曲線。
工作溶液配制
1.檢測抗體
使用后15分鐘內，將檢測抗體在Apo ELISA緩沖液中稀釋至1μg/ ml的濃度。對于每個板，在12 ml Apo ELISA緩沖液中稀釋12μl檢測抗體。
2.鏈霉親和素
在使用后的15分鐘內，將抗生蛋白鏈菌素-HRP用抗生蛋白鏈菌素-HRP稀釋劑稀釋1000倍。對于每塊板，在12 ml的鏈霉親和素-HRP稀釋液中稀釋12μl的鏈霉親和素-HRP。
操作步驟
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添加樣品（至少稀釋2倍），標準液和測定背景對照（100μl/孔）。敲擊板混合。用粘性板蓋覆蓋板，并在室溫下孵育1小時。
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如上所述清洗板。
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添加檢測抗體（100微升/孔）。蓋好板并在室溫下孵育1小時。
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如上所述清洗板。
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加入抗生蛋白鏈菌素-HRP（100μl/孔）。蓋好板并在室溫下孵育1小時。
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如上所述清洗板。
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添加TMB底物（100微升/孔）。在避開直射光的室溫下孵育15分鐘。
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向所有孔（100μl/孔）中添加Stop溶液以停止顯影。
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在15分鐘內測量450 nm處的吸光度。