藻膽蛋白是源自微藻和藍**的光合作用光捕獲蛋白家族。這些蛋白質具有共價連接的線性四吡咯基團，稱為藻膽素，其在捕獲光能中起關鍵作用。在微藻和藍**中，由這些藻膽素吸收的能量通過熒光共振能量轉移（FRET）有效地轉移到葉綠素色素用于光合作用反應。
與化學合成熒光染料相比，藻膽蛋白由于其相對高的熒光量子產率和消光系數而發出強烈的熒光信號。因為它們的熒光不被生物分子猝滅，所以藻膽蛋白可以在許多應用中用作有價值的熒光標簽。與生物分子（例如**球蛋白，蛋白A或鏈霉抗生物素蛋白）綴合的藻膽蛋白已經在流式細胞術，熒光激活細胞分選（FACS），組織化學，成像和有限程度的活性氧物種檢測中取得了巨大成功。兩種主要類型的藻膽蛋白是市售的藻紅蛋白（PE）和別藻藍蛋白（APC）。
藻紅蛋白（PE）
PE（Cat＃2558）顯示出強烈明亮的黃橙色熒光，消光系數（ε）為1,960,000cm -1 M -1 ，量子產率（Φ）為0.84。相比于Cy3的®?（目錄號141） ，它具有150000 cm的消光系數（ε）-1中號-1 和0.24的量子產率（Φ），PE是顯著亮。其吸收光譜，其特征在于三個吸收帶，在565nm處顯示出主吸收峰，在496nm和545nm處具有兩個次級峰。次生峰的相對突出性在來自不同物種的PE之間顯著不同。
藻紅蛋白有兩種形式。從RhodophytaI分離的R-藻紅蛋白（R-PE）和從Bangiales分離的B-藻紅蛋白（B-PE）。B-PE和R-PE均由三種類型的亞基組成：α（~20,000道爾頓），β（~20,000道爾頓）和γ（~30,000道爾頓）。雖然它們具有相似的亞基結構，但它們的亞基的發色團含量不同導致其吸收峰的相對強度的差異。
圖1. R-PE和B-PE的吸光度和發射光譜的比較
表 1.R-PE和B-PE的光譜性質
|
屬性
|
R-PE
|
B-PE
|
|
共同的亞基
|
（αβ）6個 γ
|
（αβ）6個 γ
|
|
MW
|
240000
|
240000
|
|
吸收*大
|
565納米
|
545nm處
|
|
額外的吸收峰值
|
498納米
|
563nm
|
|
排放量*大
|
573納米
|
572nm
|
|
消光系數（ε）
|
1.96×10 6 M -1 cm -1
|
2.41 x 10 6 M -1 cm -1
|
|
量子產率（QY）
|
0.84
|
0.98
|
|
亮度（ε×QY）
|
1.65 x 10 6 M -1 cm -1
|
2.36×10 6 M -1 cm -1
|
|
產品規格
|
A566 /A280≥5.0
|
A545 /A280≥5.5
|
|
A566 / A498 <1.5
|
A620 /A546≤0.01
|
|
A620 / A566 <0.01
|
|
別藻藍蛋白（APC）
APC（Cat＃2554）呈現明亮的遠紅色熒光，消光系數為700,000cm -1 M -1 ，量子產率（Φ）為0.68。相比于Cy5的®?（目錄號151） ，其具有的消光系數（ε=250000厘米-1中號-1）和Cy5的量子產率（Φ= 0.20）®，APC是顯著小市民。它具有在652nm處的主要吸收*大值，在625nm處具有次要*大值。APC在662nm處具有*大熒光發射，其處于可見光譜的紅**域。
圖2. APC的激發和發射光譜
表 2.APC的光譜性質
|
屬性
|
APC
|
|
共同的亞基
|
（αβ）3
|
|
MW
|
105000
|
|
吸收*大
|
651nm
|
|
排放量*大
|
662nm
|
|
消光系數（ε）
|
7.3×10 5 M -1 cm -1
|
|
量子產率（QY）
|
0.68
|
|
亮度（ε×QY）
|
4.9×10 5 M -1 cm -1
|
|
產品規格
|
A650 /A620≥1.25
|
|
A650 /A280≥4.5
|
|
交聯率≥1.0
|
百螢生物是AAT Bioquest的中國代理商，為您提供*前沿、*新的AAT 產品及資訊。